近兩年來(lái)，基因療法可謂是風(fēng)頭無(wú)二。隨著(zhù)頭一個(gè)基因療法得到了FDA的批準, 目前有超過(guò)2500個(gè)基因療法正在進(jìn)行臨床試驗，包括120多個(gè)關(guān)鍵的2/3期或3期臨床研究。近期，賓夕法尼亞大學(xué)傳來(lái)消息，基因療法“又下一城”，對于治療遺傳性失明（卵黃樣黃斑變性）有較好結果，科學(xué)家預計相關(guān)人體試驗將在2年內進(jìn)行。
 

 

　　卵黃樣黃斑變性又稱(chēng)Best病,一般表現為常染色體顯性遺傳，極少數表現為常染色體隱性遺傳。屬于黃斑部營(yíng)養不良性疾病。卵黃樣黃斑變性早期有時(shí)發(fā)病隱匿且進(jìn)展緩慢,患者容易忽視。電生理檢查時(shí)ERG一般正常。但所有卵黃樣黃斑變性患者及攜帶者的EOG均異常。表現為光峰與暗谷比值 (light-peak-dark-trough-ratio, LP/DT)降低。當病變發(fā)展到一定階段，因黃斑部變性區邊界清楚的黃色囊樣隆起形狀近似于蛋黃而得名圖（a，b）。也可以表現為視網(wǎng)膜下積液（c，d）。但此時(shí)患者視力下降多不嚴重，呈現為病變與視力損害不相稱(chēng)的臨床特征。隨著(zhù)疾病進(jìn)展，視力開(kāi)始出現明顯下降時(shí)，多有典型的較重眼底表現，臨床易于診斷。
 

 

　　上圖為卵黃樣黃斑變性狗的眼睛，左側是未治療眼，右側是基因治療5年后的眼底像。來(lái)源：賓夕法尼亞大學(xué)。

 

　　以狗為研究對象

 

　　全世界單基因黃斑變性的最常見(jiàn)形式之一是由與BEST1基因突變相關(guān)的顯性或隱性bestrophinopathies引起的。這種基因編碼了與視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)相關(guān)的跨膜蛋白，其突變導致了視網(wǎng)膜脫離和感光細胞（PR）變性死亡。

 

　　由賓夕法尼亞大學(xué)獸醫學(xué)院和賓夕法尼亞州佩雷爾曼醫學(xué)院科學(xué)家所做的一項研究顯示，狗與人類(lèi)一樣，視網(wǎng)膜中央有一個(gè)小凹處，狗可以發(fā)展出一種和人類(lèi)卵黃狀黃斑變性相似的疾病。BEST1突變會(huì )損害視網(wǎng)膜，從而導致視力喪失。

 

　　他們在犬疾病模型上的研究結果發(fā)表在《美國國家科學(xué)院院刊》（PNAS）雜志上，題目為“BEST1 Gene Therapy Corrects a Diffuse Retina-Wide Microdetachment Modulated by Light Exposure”。

 

　　佩雷爾曼醫學(xué)院的眼科研究教授A(yíng)rtur V. Cideciyan博士解釋到，“通常，眼睛里有兩個(gè)完整的視網(wǎng)膜細胞層相互交織，就像‘拉鏈’一樣，讓視覺(jué)細胞RP和支持細胞RPE相互接觸。這種疾病造成的結果的就是將這兩部分細胞分離，而我們所做的就是讓它們重新接觸，使它們緊密結合不分離。”

 

　　基因治療明顯

 

　　在犬模型中，研究人員發(fā)現6周齡的幼仔中RPE發(fā)育缺陷明顯。當研究人員使用OCT的非侵入性成像技術(shù)，來(lái)檢查患有卵黃狀黃斑變性的幼犬眼睛時(shí)發(fā)現，光照下幼犬的視網(wǎng)膜色素上皮細胞(RPE)-光感受器細胞(RP)分離顯著(zhù)惡化，相反則減少。

 

　　研究小組開(kāi)發(fā)了一種基于腺相關(guān)病毒（AAV）載體的基因治療構建體，它攜帶了一份健康的犬或人類(lèi)BEST1基因的拷貝，并將其注射到犬疾病模型中。結果證實(shí)，基因治療恢復了RPE和PR細胞之間的“拉鏈”連接。當治療過(guò)的狗的眼睛暴露在光線(xiàn)下時(shí)，視網(wǎng)膜上的細胞分離并沒(méi)有發(fā)生，治療在注射后的四周內非常明顯。

 

　　更令人鼓舞的是，經(jīng)過(guò)治療狗的眼睛在長(cháng)達5年的時(shí)間里都沒(méi)有發(fā)病。證明這種基因療法在狗身上是有效的。“在分子水平上，我們證實(shí)了犬類(lèi)和人類(lèi)的BEST1基因都能糾正RPE-PR復合物的位置，并可以恢復這個(gè)關(guān)鍵接口的細胞結構”，Cideciyan說(shuō) （封面左3）。

 

　　雖然研究人員需要繼續開(kāi)展工作來(lái)評估可靠性，確定可能獲益的人類(lèi)患者，并確定治療是否適合患有更嚴重疾病的患者，但他們希望臨床基因治療人體試驗可能在幾年內開(kāi)始。